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產品分類上海信帆生物供應真菌RNA提取試劑盒,產品有大量現貨,除此之外我們還備有血液RNA提取試劑盒,病毒RNA提取試劑盒等等,歡迎大家咨詢!
真菌RNA快速提取試劑盒適用于各種形態和各個種屬的真菌及革蘭氏陽性細菌,包括 Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、 Schizosaccharomycespombe、Pichiapastoris、Bacillus subtilis、Staphylococcusaureus 等。
(一)菌體裂解:
1.將 50 mg 的干菌絲(或 100 mg的鮮菌絲、或適當數量的真菌菌落)轉移到 1.5 mL 離心管中。對于液體真菌培養物,在1.5mL離心管中多次離心收集1-10 mL 的菌體沉淀。
2.在菌體沉淀中加入 0.4 mL 裂解液I震蕩混勻。
注:如果裂解液I存放時產生沉淀,請置于 65℃融化后使用。
3.加入 0.4 mL裂解液II,劇烈震蕩 30 s后65℃水浴 5 min。
4.12,000-15,000 rpm 離心3 min ,轉移上清到1.5 mL離心管中。
5.在上清中加入0.1 mL 的裂解液II和0.1mL氯方(自備)震蕩 30 s混勻。
6. 12,000-15,000 rpm 離心3 min ,轉移上清到5 mL 離心管中。
(二)RNA收集:
1. 在步驟(一)所得的上清中加入3倍體積(約1.5 mL )的結合液III和1倍體積(約0.5 mL)的結合液IV,顛倒數次混勻后,分多次上RNA吸附柱,每次上柱后均先室溫放置 2 min,然后 12,000 rpm 離心 1 min,倒掉穿透液。
2. 在吸附柱中加入500 μL洗滌液,12,000 rpm離心1 min,棄穿透液。
3. 再將吸附柱12,000 rpm離心30 s以甩干乙醇。
4. 將吸附柱放入一個干凈的1.5 mL離心管中。在吸附柱中央加入50 μL洗脫液,室溫靜置2 min。
5. 12,000 rpm離心2 min。離心管中溶液即為 RNA 樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
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