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文章標題《載血管生長因子殼聚糖納米粒在防治放射性皮膚損傷中的應用及其作用機制的探討》

文章中引用我司試劑盒如下：

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文章詳細內(nèi)容如下：

目的:制備載有血管生長因子的殼聚糖納米粒并探討其在放射性皮膚損傷中的應用及其作用機

制。方法:(1)大鼠臀部接受45Gy X射線照射建立放射性皮膚損傷模型,觀察大鼠輻射區(qū)的大體改

變和微循環(huán)狀態(tài)隨時間的變化。(2)將血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth

factor,VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、肝細胞生長

因子(hepatocyte growth factor,HGF)分別局部皮下注射應用于放射性皮膚損傷大鼠模型,對比

大鼠模型的大體觀、微血管計數(shù)及一步法TUNEL凋亡染色,篩選出治療效果*的血管生長因

子。(3)三聚磷酸鈉(tripolyphosphate,TPP)、殼聚糖(chitosan,CS)與篩選出的血管生長因子結(jié)

合,離子交聯(lián)法制備成納米粒,檢測其理化性質(zhì),探討其體外釋放規(guī)律。(4)將配制成的載血管生長

因子殼聚糖納米粒干燥重懸后,局部皮下注射入大鼠輻射部位,對比等量血管生長因子連續(xù)注射及

一次性注射的給藥方式,觀察電離輻射區(qū)皮膚變化,初步評價其對放射性皮膚損傷發(fā)生發(fā)展及愈合

的影響。(5)通過對比各組微循環(huán)狀態(tài)、血管內(nèi)皮細胞損傷標志物血管性血友病因子(von

Willebrand Factor,vWF)含量與細胞凋亡蛋白caspase3表達程度,進一步探討其在放射性皮膚

損傷中的作用機制。免疫組織化學技術(immunohistochemistry)、免疫印跡法(Western

blotting)對血管生長因子定性定量驗證。結(jié)果:(1)大鼠經(jīng)45Gy X射線照射后,2周脫毛,4周皮膚

形成潰瘍,兩個月潰瘍創(chuàng)面逐漸愈合,隨時間變化微循環(huán)障礙逐漸加重。(2)輻照后兩周,VEGF組輻

照區(qū)未見明顯變化,而bFGF組和HGF組部分脫毛,VEGF組可見較多微血管且較少的凋亡細胞,差異

有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(3)采用離子交聯(lián)法制備的載VEGF165殼聚糖納米粒粒徑400nm左

右,Zeta電位25.3V,包封率85%左右,體外可平穩(wěn)釋放30天,釋放率達90%。(4)VEGF165以納米顆

粒的形式注射應用于體內(nèi)后,其脫毛、潰瘍形成所需的天數(shù)與以連續(xù)注射的方式相當,兩者間差異

不顯著(P>0.05),但明顯多于對照組及一次性注射的用藥方式(P<0.01),創(chuàng)面愈合所需天數(shù)較其他

三組少,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(5)VEGF165以納米顆粒及連續(xù)注射的方式應用后兩周開

始,微血管計數(shù)和vWF含量多于對照組和一次性單純注射VEGF165組,差異有統(tǒng)計學意義

(P<0.01);caspase3表達程度弱于對照組和一次性單純注射VEGF165組。經(jīng)驗證,VEGF165以納

米顆粒及連續(xù)注射的方式應用后,組織內(nèi)VEGF165的含量明顯多于對照組和一次性單純注射

VEGF165組。結(jié)論:(1)當X射線放射劑量為45Gy時,大鼠可形成明顯的皮膚損傷創(chuàng)面,微血管損傷

與微血栓形成隨時間程度逐漸加深,具有長期性、持久性、潛在性和進行性作用的特征。

(2)VEGF165能夠有效地延緩大鼠模型放射性皮膚損傷的發(fā)生發(fā)展。(3)離子交聯(lián)法制備的載

VEGF165殼聚糖納米粒,不僅具有較高的包封率,而且理化性質(zhì)穩(wěn)定,體外釋放平穩(wěn),并且在大鼠模

型體內(nèi)起到了一定的緩釋作用,實現(xiàn)了VEGF165的可持續(xù)作用。(4)載VEGF165殼聚糖納米粒可

能是通過保護血管內(nèi)皮細胞,抑制內(nèi)皮細胞凋亡,防止血栓形成,延緩放射性皮膚損傷的發(fā)生發(fā)展,

并且促進放射性皮膚損傷的愈合。