胎牛血清采血方法及保存
1、挑選出大約8月齡以上的健康妊娠母牛,經剖腹獲取小牛。
2、將小牛清洗干凈后,側放在萬級潔凈房間內的采血臺上,固定四肢及頭部。
3、用來蘇水清洗心臟外部,刮去心臟外部牛毛,露出心臟外部一側皮膚,用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心臟部位切開一道10厘米左右的切口,取出近心血管,先用2%碘酒消毒,再用75%的酒精消毒,用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采血管流入另一個潔凈房間內的采血瓶中。
5、采血瓶采血前經干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采血前先晃動瓶內生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采血并加塞封口。將采血后的采血瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。
采集后的胎牛血清需要冷凍保存,那么在下一次使用的時候,如何解凍呢?下面就來說說胎牛血清解凍過程。
(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
(2)血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。
(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。
(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。