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產(chǎn)品分類信帆生物銷售二胺氧化酶試劑盒,歡迎新老客戶訂購!
信帆生物專業(yè)提供二胺氧化酶,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,*,確保銷售給客戶的產(chǎn)品是能夠符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),適合客戶要求的產(chǎn)品。本產(chǎn)品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.
測定意義:
DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。
測定原理:
DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫,外源添加過量的辣根過氧化物酶,催化過氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì),在460nm處有特征吸收峰,通過測定該波長吸光度增加速率,計算DAO活性。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體60mL×2瓶,4℃保存。
試劑一:液體0.25mL×1支,4℃保存。
試劑二:液體2mL×1管,4℃保存。
試劑三:液體1mL×1管,4℃保存。
粗酶液提取:
測定操作表:
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至460nm,蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
| 對照管 | 測定管 |
粗酶液(μL) | 50 | 50 |
提取液(μL) | 128 | 108 |
試劑一(μL) | 2 | 2 |
試劑二(μL) | 20 | 20 |
試劑三(μL) |
| 20 |
混勻,37℃水浴30min,微量石英比色皿/96孔板,測定460nm吸光值。ΔA=A測定-A對照。 |
酶活性計算公式:
酶活性定義:每mg組織蛋白或每毫升血清在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1μmol H2O2定義為一個酶活性單位。
1. 組織:DAO活性(U/mg prot)= ΔA÷225÷0.25÷Cpr
2. 血清:DAO活性(U/mL)= ΔA÷225÷0.25
注意事項:
1、如果OD值小于0.02,適當(dāng)加大提取用樣本質(zhì)量;OD值大于0.8,粗酶液可適當(dāng)稀釋,或者減少提取用樣品質(zhì)量。
2、樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測定。
信帆生物科技有限公司是一家集生物技術(shù)咨詢、實驗室耗材、科研試劑的銷售、推廣和售后服務(wù)為一體的高科技生物企業(yè),為各大科研機(jī)構(gòu)、高校、技術(shù)生物企業(yè)提供相關(guān)產(chǎn)品。公司憑借良好的產(chǎn)品質(zhì)量和營銷團(tuán)隊的奮力開拓,市場空間逐步擴(kuò)大,營銷網(wǎng)絡(luò)覆蓋全國,為客戶供應(yīng)服務(wù),、用心的服務(wù)贏得了眾多企業(yè)的信賴和好評,在生物設(shè)備領(lǐng)域迅速崛起。
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