信帆生物羧酸酯酶檢測試劑盒到款一批，歡迎訂購

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測定意義：

哺乳動物CarE，也稱脂族酯酶（aliesterase），廣泛分布于組織和器官，屬于絲氨酸水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內源性與外源性物質水解，但不能催化水解乙酰膽堿及其類似物。CarE參與脂質運輸和代謝，并且與多種藥物、環境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關，有機磷農藥可結合并且抑制CarE活性。

測定原理：

CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，固籃顯色；在450 nm光吸收增加速率，計算CarE活性。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍和蒸餾水。

試劑組成和配置：

試劑一：液體×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體×1瓶（棕色），4℃避光保存（收貨后一周內完成測定）。

粗酶液提取：

稱約0.02g組織，加入1 mL試劑一，冰上充分研磨，15000rpm 4℃離心30min，取后待測。

測定：

1. 分光光度計預熱30min以上，調節波長到450 nm，蒸餾水調零。

2. 試劑二置于37℃水浴中預熱30 min以上。

3. 空白管：取微量玻璃比色皿/96孔板，依次加入5μL蒸餾水和200μL試劑二，迅速混勻，于450nm處測定3min內吸光值變化，第10s吸光值記為A1，第190s吸光值記為A2。注意：空白管只需做1~2次。△A空白管=A2-A1

4. 測定管：取微量玻璃比色皿/96孔板，依次加入5μL上清液和200μL試劑二，迅速混勻，于450nm處測定3min內吸光值變化，第10s吸光值記為A3，第190s吸光值記為A4。△A測定管=A4-A3

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