DS雙染試劑盒(抗小鼠IgG/AP+抗兔IgG/HRP)
上海信帆生物供應DS雙染試劑盒(抗小鼠IgG/AP+抗兔IgG/HRP),產品質量穩定,現貨供應!
分類: 檢測系統
子分類: DS雙染試劑盒
規格: 60測試/盒,120測試/盒
主要成分: 試劑1 內源性過氧化物酶阻斷劑
試劑2 即用型組合二抗(HRP標記抗兔IgG+AP標記抗小鼠IgG)
試劑3 顯色劑3A 顯色劑3B
試劑4 顯色劑4A 顯色劑4B
檢驗方法: 1) 脫蠟和水化石蠟切片置于新鮮二甲苯中,2缸,浸泡10分鐘/缸;去除多余的液體后,置于無水乙醇中,2缸,浸泡2分鐘/缸;去除多余的液體后,置于95%乙醇中,1缸,浸泡2分鐘;去除多余的液體后,置于75%乙醇中,1缸,浸泡2分鐘;去除多余的液體后,蒸餾水沖洗,置于Ultra沖洗緩沖液中。
2) 抗原修復 高壓鍋中,加入EDTA抗原修復液,高火預熱;待修復液沸騰后將切片置于其中,并*浸泡組織,蓋好鍋蓋,扣上壓力閥,高火繼續加熱;待限壓閥開始轉動噴氣后調至中火,同時開始計時2.5分鐘;計時結束后離開熱源,放氣降壓后將高壓鍋移入冷水中冷卻;待鍋中液體冷卻至室溫后取出切片,Ultra沖洗緩沖液浸泡清洗2分鐘×3次。
3) 滴加試劑1 加入50μL的試劑1(內源性過氧化物酶阻斷劑),室溫孵育10分鐘;蒸餾水洗2次后甩干液體,用免疫組化筆在距離組織周圍2-3mm處畫圈;Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。
4) 根據檢測需要滴加50μL 組合一抗或空白對照試劑,37℃孵育60分鐘或2~8℃孵育過夜;Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。
5) 滴加試劑2 滴加50μL 試劑2,37℃孵育30分鐘;Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。
6) 滴加試劑3 滴加50μL試劑3,室溫孵育10-15min;Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。
7) 滴加試劑4 滴加50μL試劑4,室溫孵育5-10min;自來水沖洗。
8) 復染 蘇木素染色液室溫染色30~60秒,自來水沖洗干凈,晾干。注意:需要控制蘇木素染色液的染色強度。顏色過淺或過深都會干擾顯色結果的觀察。
9) 水洗后返藍
10) 快速脫水、透明、中性樹膠封片。
11) 結果判讀 在光學顯微鏡下對染色后切片進行觀察和結果判讀。
DS雙染試劑盒(抗小鼠IgG/AP+抗兔IgG/HRP)