促腎上腺皮質素釋放激素放免藥盒說明書
CRH RIA KIT
促腎上腺皮質激素釋放激素（CRH）由下丘腦神經元合成，能刺激垂體促腎上腺皮質細胞前
阿黑皮素原基因的表達和促腎上腺皮質激素及其相關肽的合成與釋放。CRH 不僅在腦內分布廣
泛，且人胎盤組織、羊膜、絨毛膜和蛻膜、大鼠胸腺和脾臟乃至植物血凝素刺激的人T 淋巴細
胞都可合成與分泌。人CRH 與大鼠CRH *同源，都為41 肽，與羊CRH 有7 個氨基酸殘基
不同。
試劑盒組成與配制：
1、CRH 標準品6 瓶，其濃度分別為0、1.5、5.0、15.0、45.0、135.0ng/ml。
2、125I-CRH 1 瓶。
3、CRH 抗體1 瓶。
4、緩沖液一瓶。
5、分離劑(第二抗體)一瓶。
樣本收集和提取：
1、靜脈血3ml，注入含0.5M EDTA-Na230ul 的試管中，混勻，離心，取血漿測定。
如貯于－20℃2-3 月內測定不影響結果。
2、組織的提取：取大小適宜的組織塊，立即稱重后于煮沸的生理鹽水（1ml）中煮
沸3 分鐘，再加1Ｎ冰醋酸0.5ml 于勻漿器中勻漿提取,再用1ＮNaOH 0.5ml 中
和，離心3000 轉/分，30 分鐘(是低溫離心)。取上清液貯存于－20℃以下
待測樣本可保留2-3 個月。
測定操作步驟：
CRH RIA 操作程序加樣單位:ul
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試劑T NSB B0 S1-S8 標本
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緩沖液—— 200 —— —— ——
零標準—— —— 100 —— ——
標準液—— —— —— 100 ——
標本—— —— —— —— 100
抗體—— —— 100 100 100
125I-CRH 100 100 100 100 100
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混勻，4℃ 放置24 小時
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分離劑500 500 500 500 500
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混勻，室溫放置15 分鐘，3500 轉/分離心15 分鐘。棄上清，測沉淀計數(cpm)。
結果計算：
以N/T、B/T 計算NSB、S0 結合百分率，以B/B0 計算標準及待測物結合百分率，
在半對數座標紙上繪制標準曲線，并查出樣品值或由自動Υ-計數儀器直接讀出結果。
注意事項：
1、本月標準品每瓶用0.8 ml 緩沖液稀釋
2、本月藥盒抗體每瓶用5.0 ml 緩沖液稀釋
3、本月藥盒標記每瓶用5.5 ml 緩沖液稀釋
藥盒的技術指標：
1、靈敏度:≤ 3Pg/ml。
2、重復性:批內cv< 8％,批間cv<12％。
3、回收率:平均回收率88％。
4、正常參考值：5.1±2.1 ng/ml
本月藥盒參考數據：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% 2.1 B0/T% 35 B/ B0 % 94 82 65 38 19
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